치은 섬유아세포와 타액선 세포주에서 유지놀 처리에 따른 고사에 관한 연구
Eugenol-Induced Apoptosis in Human Gingival Fibroblast Cell and Human Salivary Gland Cell Line
구강과학- 전남대학교 2003년 15권 4호 p.356 ~ 366
소속 상세정보
Kim, Ok-Joon/김옥준
Park, Hyang-Suk/Choi, Hong-Ran/박향숙/최홍란
KMID : 0988420030150040356
Abstract
유지놀은 페놀 계통의 물질이며 치과 치료에 광범위하게 이용되고 있다. 치과 치료의 특성상 유지놀은 치수 및 치아주위 조직에 접촉하게 되고 고사에 의한 세포독성을 유발할 것이라고 알려져 있지만, 이와 관련한 분자 생물학적 기전은 거의 보고 되지 않고 있다. 따라서 본 실험은 유지놀을 치은섬유아세포 및 타액선 세포주에 처리한 후 고사의 분자생물학적 기전을 알아보기 위해 고사 과정에 관련한다고 알려진 Bcl계 물질 및 caspase 활성도를 관찰하였다.
항산화제인 N-acetylcystein (NAC)을 처리한 군과 처리하지 않은 군을 비교하여 MTT reduction assay를 하였고, propidium iodide 염색을 하여 세포 모양을 관찰하였다. 또한 고사 기전을 관찰하기 위해 Bcl-2, Bax, Apaf-1 mRNA 발현과 caspase 활성도를 측정하였다.
MTT reduction assay와 NAC을 처리한 군에서 처리하지 않은 군에 비해 세포사가 감소하여 유지놀이 산화제로 작용함을 알 수 있었고, 현미경 소견에서 핵분절 및 염색질 농축이 관찰되어 유지놀은 고사 과정을 통한 세포사를 일으킨다고 생각하였다.
고사 기진을 알아보기 위한 실험에서 치은 섬유아세포에서는 Bcl-2와 Bax mRNA 발현의 변화가 없었고, Apaf-1 발현을 관찰할 수 없었다. 타액선 세포주에서는 Bax의 발현이 증가하고 Bcl-2의 발현은 감소하였으며 Apaf-1 발현은 관찰되기는 하였으나 유의한 증가를 보이지는 않았다. Caspase9과 3의 활성도를 측정한 결과 치은 섬유아세포에서는 변화가 없었고, 타액선 세포주에서는 caspase 9은 감소하고 caspase 3는 증가하였다.
위의 결과로 유지놀은 타액선 세포주에서 Bcl계 및 caspase를 통한 고사를 일으킴을 알 수 있었고 치은섬유아세포는 좀 더 많은 연구가 필요하다고 사료었다.
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